布鲁斯（Bruce）一只崇尚素食主义的大白鲨。

奈杰尔（Nigel）一只奇特的鹈鹕，对除海鸥以外的任务物种都怀有好感，这只年纪不小的老鸟居住在澳洲雪梨港口一带。

玛林（Marlin）是一只生活在大堡礁的小丑鱼，生性胆小、懦弱，自从在一次鲨鱼袭击中失去了他亲爱的妻子和除尼莫外的所有孩子后，变得更加谨小慎微，非常深爱自己的儿子尼莫。

多莉（Dory）是一只雌性蓝唐王鱼，热心、乐观，但却有一个健忘的小毛病，好心地带玛林寻找儿子，却常常带错路。她是玛林寻子途中遇到的一位朋友、帮手。

尼莫（Nemo）片中小主角、玛林之子，是一只橙色带条纹的公子小丑鱼，爱冒险的它调皮而顽强。

有点黑社会老大性质的神仙鱼，讨厌人类，原来来自大海，脸上有伤疤，右鳍有残，像是经历过很多磨难，在牙医的鱼缸里生活，渴望自由的大海，教会尼莫很多道理，最后与鱼缸里的几位鱼虾弟兄逃往大海。